La asistencia técnica en la adquisición de imágenes de microscopía confocal mediante los equipos Leica TCSP2 y Leica TCSP5.

 

En 2013 el laboratorio fué certificado conforme a la norma ISO 9001, Certificado%20ER-0286_2009_2018-02-16.pdf

EQUIPOS DEL SERVICIO

• Estereomicroscopio de fluorescencia Leica MZ16 FA con cámara en color Leica DFC490 con luz transmitida y filtros de fluorescencia para UV, GFP y TXR

• Cámara CCD Leica DFC350 FX sobre Microscopio Zeiss Axioplan con contraste de fase y fluorescencia

• Microscopio confocal Láser (CLSM) LEICA TCS SP5 con 8 líneas de laser (405, 457, 477, 488, 496, 514, 543, 633 nm) Sistemas de AOTF (Acousto-Optical Tunable Filter), y AOBS (Acousto-Optical Beam Splitter). Platina motorizada.

• Microscopio confocal Láser (CLSM) LEICA TCS SP2 con 7 líneas de laser ( 457, 477, 488, 496, 514, 543, 633 nm). AOTF and AOBS.

• Sistema multidimensional de microscopía  avanzada de fluorescencia de alta velocidad para observación in vivo Leica AF6000 LX. Equipado con microscopio invertido DMI6000B con cámara de cultivo termostatizada, control de CO2 y dos cámaras Hamamatsu: una CCD 9100-O2 y Orca-Flash 4.0 LT Digital CMOS. Esta última equipada con un divisor de haz (W-View Gemini) y con un tándem de filtros para GFP y mCherry  que posibilita la adquisición simultanea de ambas señales. Platina motorizada.

• Estación de trabajo de análisis y procesamiento de imagen con distintos programas, incluido Metamorph offline (Molecular Devices), y sistema de almacenamiento de datos centralizado, accesible desde la Intranet del Centro.

Fluorocromos: El servicio ofrece además alícuotas de buen número de fluorocromos a precio reducido.

ALICUOTASFluorocromos%20S%20ConfCCD%20Jl%202018.pdf

 

Instrucciones

Si el cliente pertenece al Centro de Investigaciones Biológicas (CIB) debe hacer la reserva en el calendario de la intranet según las normas que están expuestas en dicha página de reservas.

Los clientes externos al CIB se pondrán en contacto con el servicio mediante correo electrónico ( confccd@cib.csic.es ) o teléfono ( 918 373 112 ext. 4401). La persona del servicio que recoja el mensaje hará la reserva en el calendario de la intranet. Además deberán aportar una serie de datos para rellenar la Oferta de Prestación de Servicio, que les será enviada desde la administración del Centro.

El horario del Servicio es de 8 a 17h, de lunes a jueves y de 8 a 15h  los viernes.

PNA-SMC004-F01%20Tarifas%20Junio%202018_0.pdf

 

 

Miembros

 

Más Información

SERVICIOS OFERTADOS

Confocales:

  • Adquisición de imágenes en distintos modos de escaneo: XY, Xt, XYZ, XZY, XYZʎ, XYZt..
  • Reconstrucciones 3D
  • Análisis FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching),
  • Análisis FRET (Förster resonance energy transfer) y otros análisis dinámicos.
  • Fotoconversión
  • Análisis de colocalización de moléculas
  • Multiposicionamiento e imágenes compuestas

Sistema multidimensional de microscopía  avanzada de fluorescencia para observación in vivo:

  • Adquisición de imágenes multidimensionales en X, Y, Z, t, y ʎ. Equipado con gran variedad de  filtros de fluorescencia que cubren todo el espectro visible desde el UV al infrarrojo cercano. Adquisición de time-lapse completamente automatizada.
  • FRET (Förster resonance energy transfer) con filtros CFP-YFP
  • Estudios ratiométricos de calcio (FURA) in vivo y otros estudios dinámicos.
  • Aplicaciones motorizadas: Multiposicionamiento por el que el usuario puede definir distintas posiciones XYZ en el mismo experimento para ser seguidas a lo largo del tiempo. Capacidad especialmente útil en estudios de procesos dinámicos en células vivas. Generación de imágenes compuestas: teniendo la capacidad de a partir de un punto, cubrir un área a determinar por el usuario, en el que el sistema hará imágenes y las compondrá en una sola, incluso con múltiples canales y 3 dimensiones.
  • Estudios de colocalización de proteínas in vivo con alta resolución espacial y temporal. La cámara Hamamatsu Orca Flash 4.0 LT tiene una resolución espacial de 2048 x2048 pixeles (con un tamaño de pixel de 6,5 µm), y una resolución temporal mínima de 30 frames por segundo (30 fps), con capacidad de llegar a 1000 fps. Tiene, además, acoplado un repartidor de haz (W-View Gemini) con filtros GFP/mCherry, lo que permite una adquisición simultanea de imágenes de estas dos proteínas fluorescentes, incrementando la resolución temporal, ya muy alta de esta CMOS, para estudios de colocalización, ratiométricos y otros estudios dinámicos. Software de adquisición y análisis: Metamorph (Molecular Dynamics).

Microscopio de epifluorescencia con cámara CCD

Microscopio Axioplan Universal Zeiss con contraste de fase y epifluorescencia para UV, verde y rojo. Cámara Leica DFC350FX

Estereomicroscopio LEICA MZ16FA

Objetivo 1× AN 0,14 /oculares 10×. Rango del zoom ( 16:1): 7.1× – 115×. Resolución 420Lp/mm. Campo visual 29,6mm – 1,8mm (según combinación óptica). Cámara en color Leica DFC490 de 8 Mpx. Aplicaciones: Permite la observación de muestras y la captura de imágenes tanto con luz visible (base de diascopía con contraste de Rottermann, campo claro, campo oscuro, y fuente de luz fría), como con luz de epifluorescencia (UV, GFP, TXRed). Adquisición de imágenes en distintas resoluciones y formatos.

Procesamiento y análisis de imágenes con una estación de trabajo dedicada, con distintos software de tratamiento y análisis de imagen, incluyendo Metamorph offline.

El Servicio está equipado con un sistema de almacenamiento en red, modular y de gran capacidad donde se vuelcan las imágenes de todos los equipos, accesible mediante contraseña desde cualquier ordenador conectado a la intranet del CIB.
 

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